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专家对话 | 保健食品申报中薄层的鉴别方法
保健食品在申报过程中需要进行【成分分析、安全性评估、功效测试】等多个环节的检测,而薄层色谱技术常用于【鉴别成分及成分分析】这一环节。因其操作简便、成本低廉、分离效果明显而被广泛应用。
本期《专家对话》,我们邀请到了国联质检专家郭群老师,将【保健食品申报中薄层的鉴别方法与注意事项】做以专业的讲解和全面的介绍,内容涉及方法研究及研究思路等内容。帮助大家全方位快速习得保健食品中药品成分及含量的鉴别方法。以促进大家生产、研发和申报工作的顺利进行。
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专家介绍
郭群
■国联质检生命科学领域专家
●研究员,毕业于华西医科大学
●从事药品及保健食品配方研究、配方论证、工艺研究、薄层鉴别方法研究、方法开发等专项工作30余年
●取得新药证书及保健食品证书14个,参与制定药品国家标准、保健品标准等共计14个
●获得天津市科技进步三等奖3项
薄层是什么?它在保健食品申报中的作用是什么?
薄层的全称叫薄层色谱法(TLC),它是将适宜的固定相涂布于玻璃板、塑料或铝基片上,成一均匀薄层。待点样、展开后,根据比移值(Rf)与适宜的对照物按同法所得的色谱图的比移值(Rf)作对比,用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定的方法。
薄层色谱法是快速分离和定性分析少量物质的一种很重要的实验技术,也用于跟踪反应进程。
薄层色谱方法研究
(1)展开剂的溶剂选择原则
合适的纯度
适当的稳定性和低毒性
低粘度、沸点和挥发性集中
不与待测组分和吸附剂发生化学反应
(2)展开剂的选择条件
l 采用“相似相溶”原则来选择展开剂
l 若待测组分的斑点都移动到溶剂前沿,说明展开剂极性过强;若待测组分几乎不能移动,说明展开剂极性过弱
l 展开剂的配置应严格控制其比例的精准度
l 展开剂中加入少量酸或碱等拖尾抑制剂
l 展开剂中比例较大的溶剂其极性应相对较弱,具有溶解物质和基本分离作用
l 展开剂中比例较小的溶剂其极性应大,对被分离的组分有较强的洗脱能力,帮助化合物在薄层上移动,可增大Rf值。
(3)显色条件的选择条件
l 首选紫外色谱荧光斑点,以365nm为主,在复方制剂中尤其注意。
l 中国药典的药材项下的方法优先,特征显色剂优先。
l 桂枝 桂皮醛 二硝基苯肼乙醇溶液
l 对照药材溶液对照
薄层色谱方法研究中有哪些关键点需要注意?
01样品溶液
一般用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿等挥发性有机溶剂,点样量一般为0.5μl~10μl。
02点样手法
接触式点样直径通常控制在3mm以内,采用边点样边吹干溶剂的方式。多次点样确保圆心要重合。
03直线型上行展开
多数采用直线型上行展开,薄层板水平角度以75度为最佳。
04多次展开
直到混合物分离为止。
05分布展开
混合物性质差别较大时,一种流动相不能有效分离时,可采用不同溶剂依次展开不同距离。
06二维展开
在两个垂直的方向上进行展开。将样品点在薄层板的一个角上,展开适当距离后,挥干溶剂,再将薄层板与原展开方向成90度的方向再次展开。
07物理方法
1.紫外光下显示荧光或荧光淬灭2.碘蒸气——与物质的反应往往是可逆的,当化合物 定位后在空气中放置时,碘升华挥去,可恢复到显色前状态,有利于薄层进一步处理。
08化学方法
加化学试剂显色,要求显色稳定、持久、灵敏。如香草醛硫酸、茚三酮、硫酸乙醇、磷钼酸等等。
薄层色谱方法研究思路
1、查阅处方中各个药材的主要化学成分及待检药材主要成分的理化性质、稳定性、溶解度等。
2、查阅待检药材相关的薄层文献,遵循低毒、低成本、简单快速易操作、重现性好的原则得出初步研究思路。
3、前处理选择;根据样品的自身性质和检测方法进行选择。
4、每张板跑完后都应先到紫外光灯下检视,然后决定是否喷显色剂。
5、根据薄层色谱中斑点的清晰度、分离度、背景颜色等对薄层方法进行优化。
以上就是关于薄层色谱方法的全部内容了,如果您对于关于薄层方法研究还有疑问,或者想了解关于保健食品的其他研究课题也可以随时留言,我们将邀请我们专业老师为您答疑解惑。
国联质检保健食品
核心竞争力
权威资质:我们拥有CMA、CNAS、GLP、CFDA(国家市场监督管理总局备案的“特殊食品验证评价技术机构”)等资质,可承接保健食品原料的卫生学、稳定性及功效/标志性成分试验,安全性毒理学评价试验
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